Esercitazione per il corso "Analisi bioinformatica delle proteine" dott.M.Ramazzotti, prof. G.Manao Proteina di interesse: mioglobina a) Ricerca in banca dati. In quale banca dati? ________________________ Quante nei hai trovate? ________________________ Ne esiste una umana? ________________________ Qual'è il suo ID? ________________________ Sequenza aminoacidica (fasta): ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ Sequenza nucleotidica (a blocchi di 9 residui): ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ b) Cross-references. Pattern tipici della famiglia. Database: ________________________ Entries: ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ Classificazione biologica: ________________________________________________________ Funzione: ________________________________________________________ Articolo/i più recente che parli/no di lei: ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ Review/s sulla sua attività biologica: ________________________________________________________ ________________________________________________________ d) Ricerca tramite BLAST della proteina trovata. Quale BLAST scegli? ________________________ E value (default): ________________________ Word size (default): ________________________ Gap Open (default): ________________________ Matrice di sostituzione: ________________________ Numero di entry trovate ________________________ Numero di entry con E < 10-20 ________________________ Salva un file con tutte le sequenze con E < 10-70 in formato fasta. e) Allineamenti multipli di tutte le proteine con E < 10-70. Quale programma scegli? ________________________ Quale matrice utilizzi? ________________________ Gap open (default): ________________________ Gap extension (default): ________________________ f) Gestione del multiallineamento. 1. Colorazione Quale programma scegli? ________________________ Genera una immagine e salvala su disco. 2. Sequenza consenso Quale programma scegli? ________________________ Sequenza consenso: ________________________________________________________ ________________________________________________________ g) Una prima analisi. 1. Confronta la sequenza consenso con i pattern trovato in precedenza. Cosa si può dire? ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ 2. Chiama la proteina di interesse nella banca dati Swiss-Prot e osserva le annotazioni sulla funzione dei vari residui che la compongono. Commenti? ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ h) Predizione della struttura secondaria. Quale programma scegli? _______________________ Struttura secondaria predetta: ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ ________________________________________________________ i) Struttura tridimensionale. Trova la proteina nella banca dati PDB. Codice di identificazione: ______________________ Scarica il file con la struttura. Che programma utilizzi per la visualizzazione? ______________________ Colora la proteina in base alla struttura secondaria. La struttura secondaria predetta in precedenza è corretta? ______________________ In base alle informazioni raccolte finora rendi evidenti i residui che ritieni importanti per la proteina.